摘要：為了解湖南省原種豬場(chǎng)主要繁殖障礙性疾病的流行情況及免疫抗體水平，2015—2019年對(duì)5個(gè)原種豬場(chǎng)，采集血清及對(duì)應(yīng)扁桃體樣品各1000份進(jìn)行主要繁殖障礙性疾病檢測(cè)，其中對(duì)扁桃體樣品進(jìn)行豬瘟病毒（CSFV）、豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）、高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒（HP-PRRSV）、偽狂犬病病毒（PRV）、圓環(huán)病毒2型（PCV2）、豬細(xì)小病毒（PPV）病原檢測(cè)，對(duì)血清樣品進(jìn)行CSFV、PRRSV、PRV-gB免疫抗體檢測(cè)。結(jié)果顯示：CSFV、PRRSV、HP-PRRSV、PRV、PCV2和PPV病原陽(yáng)性率分別為0、2.1%、1.3%、9.5%、22.1%、28.9%；部分場(chǎng)PRV感染抗體（gE）反復(fù)出現(xiàn)轉(zhuǎn)陽(yáng)，多數(shù)豬場(chǎng)PCV2和PPV感染較嚴(yán)重；CSFV、PRRSV、PRV-gB免疫抗體合格率分別為96.9%、99.7%、98.7%，均超過(guò)了國(guó)家規(guī)定的70%的最低標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果表明，這5個(gè)原種豬場(chǎng)的CSFV、PRRSV、PRV抗體保護(hù)水平良好，且豬瘟基本達(dá)到了免疫無(wú)疫狀態(tài)，但部分原種豬場(chǎng)仍存在不同程度的PRRSV、HP-PRRSV、PRV、PCV2、PPV感染，其中PCV2與PPV感染較為嚴(yán)重，需通過(guò)免疫、監(jiān)測(cè)、生物安全控制等綜合措施，加強(qiáng)控制與凈化。

繁殖障礙性疫病是以母豬流產(chǎn)，產(chǎn)死胎、弱胎、木乃伊胎，以及不孕不育為主要特征的一類(lèi)疫病，常見(jiàn)的有豬瘟（CSF）、豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）、豬偽狂犬?。≒R）、豬圓環(huán)病毒?。≒CVD）、豬細(xì)小病毒?。≒PI）等。這幾種病的病原臨床多表現(xiàn)為混合感染，也可通過(guò)種豬垂直傳播至下一代，造成更大范圍的感染，給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。自非洲豬瘟在我國(guó)暴發(fā)以來(lái)，種豬已成為當(dāng)前養(yǎng)豬業(yè)的稀缺資源，如何防控非洲豬瘟和主要繁殖障礙性疫病，提高母豬健康水平和生產(chǎn)性能，是種豬場(chǎng)急需解決的問(wèn)題。當(dāng)前，湖南省共有原種豬場(chǎng)17個(gè)，一級(jí)擴(kuò)繁場(chǎng)131個(gè)，其他類(lèi)型種豬場(chǎng)300余個(gè)。為了解湖南省原種豬場(chǎng)主要繁殖障礙性疫病流行情況，結(jié)合我國(guó)原種豬場(chǎng)的監(jiān)測(cè)要求，自2015年開(kāi)始，對(duì)省內(nèi)5個(gè)原種場(chǎng)進(jìn)行了CSF、PRRS、PR、PCVD、PPI等主要繁殖障礙性疫病的病原和抗體監(jiān)測(cè)，以期為全省種豬主要繁殖障礙性疫病防控及凈化策略制定提供參考。

材料與方法

材料

待檢樣品。根據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部畜牧獸醫(yī)局關(guān)于《種畜禽場(chǎng)主要?jiǎng)游镆卟”O(jiān)測(cè)實(shí)施方案》要求，并結(jié)合湖南省原種豬場(chǎng)自身情況，自2015起，在湖南省原種豬場(chǎng)，選擇存欄量在5000頭以上的5個(gè)大型原種場(chǎng)（A、B、C、D、E），每年6—8月進(jìn)行一次采樣檢測(cè)。樣品來(lái)源原則上每個(gè)原種豬場(chǎng)不少于3棟豬舍的豬只，其中種公豬5頭、經(jīng)產(chǎn)母豬25頭（1~2胎5頭、3~4胎10頭、5~6胎10頭）、后備母豬10頭（40~60kg 5頭、90~110kg 5頭）。每個(gè)原種豬場(chǎng)共計(jì)采集40份豬血清及相對(duì)應(yīng)的40份扁桃體樣本。截至2019年，共在5個(gè)原種豬場(chǎng)，采集豬血清及扁桃體樣品各1000份，-20℃以下保存待檢。

病原學(xué)檢測(cè)試劑。豬瘟病毒（CSFV）通用型實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒（50頭份），豬圓環(huán)病毒Ⅱ型（PCV2）實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)試劑盒（50頭份），豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）通用型RT-PCR檢測(cè)試劑盒（50頭份），PRRSV Nsp1594-1680變異株RT-PCR檢測(cè)試劑盒（50頭份），豬細(xì)小病毒（PPV）實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)試劑盒（50頭份）。

主要儀器設(shè)備。核酸提取儀、PCR儀、熒光PCR儀、組織研磨儀、酶標(biāo)儀、離心機(jī)等。

方法

病原學(xué)檢測(cè)。將采集的扁桃體樣本搗碎，提取病毒核酸。采用實(shí)時(shí)熒光定量方法，檢測(cè)組織樣本中CSFV、PCV2、PPV核酸。體系配置、反應(yīng)條件及判定標(biāo)準(zhǔn)，參照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。對(duì)病毒核酸先使用通用型RT-PCR擴(kuò)增PRRSV，對(duì)陽(yáng)性樣品再用RT-PCR進(jìn)行HP-PRRSV（變異株）擴(kuò)增，根據(jù)結(jié)果判定感染類(lèi)型；在用PRV gE基因缺失疫苗免疫的豬場(chǎng)，檢測(cè)PRV-gE抗體，若呈陽(yáng)性，則判定為PRV野毒感染，即病原陽(yáng)性。試驗(yàn)操作嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

血清學(xué)檢測(cè)。所有采集的血清樣本，利用ELISA方法檢測(cè)血清中CSFV、PRRSV、PRV-gB抗體，參照各試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作及判定標(biāo)準(zhǔn)。本調(diào)查未進(jìn)行PPV、PCV2免疫抗體檢測(cè)。

結(jié)果與分析

病原學(xué)監(jiān)測(cè)

不同年份感染情況。2015—2019年，5個(gè)原種豬場(chǎng)均未檢測(cè)到CSFV核酸陽(yáng)性，部分或全部豬場(chǎng)檢測(cè)到PRRSV、HP-PRRSV、PRV、PCV2、PPV核酸陽(yáng)性（表1），個(gè)體陽(yáng)性率分別為2.1%、1.3%、9.5%、22.1%、28.9%（表2）。不同年份的病原感染情況存在一定差異，其中PRRSV與HP-PRRSV核酸陽(yáng)性率整體呈下降趨勢(shì)，而PRV、PCV2、PPV整體呈波動(dòng)狀上升趨勢(shì)，且PCV2和PPV污染面廣，感染較嚴(yán)重。

不同病原感染情況。由表2可見(jiàn)：5個(gè)種豬場(chǎng)連續(xù)5年未檢測(cè)到CSFV核酸陽(yáng)性，說(shuō)明CSF基本達(dá)到了免疫無(wú)疫狀況。PRRSV和HP-PRRSV感染反復(fù)出現(xiàn)，2017年和2019年核酸檢測(cè)均為陰性，其他年份均檢測(cè)到陽(yáng)性。PRV感染率呈波動(dòng)狀變化，2015、2016和2018年核酸陽(yáng)性率在2.5%以下，而2017和2019年核酸陽(yáng)性率陡增至20%以上。PCV2和PPV核酸陽(yáng)性率居高不下，在14.5%~41.0%之間波動(dòng)。

不同豬場(chǎng)感染情況。5個(gè)原種豬場(chǎng)連續(xù)5年的病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果（表3）顯示：A場(chǎng)PRRSV核酸和PRV-gE抗體連續(xù)5年保持陰性，HP-PRRSV偶有檢出，PCV2和PPV陽(yáng)性率在0~32.5%之間波動(dòng)；B場(chǎng)病原陽(yáng)性率整體較低，但個(gè)別年份高發(fā)，如2019年P(guān)RV-gE陽(yáng)性達(dá)到50.0%，PCV2陽(yáng)性率達(dá)到52.5%，2016年P(guān)PV陽(yáng)性率高達(dá)82.5%；C場(chǎng)PRRSV陽(yáng)性率較低，但PRV、PCV2、PPV核酸陽(yáng)性率普遍較高；D場(chǎng)PRRSV連續(xù)5年檢測(cè)為陰性，PRV-gE在2017和2019年突然轉(zhuǎn)陽(yáng)，陽(yáng)性率在50%以上，PCV2和PPV陽(yáng)性率高低起伏，2019年P(guān)PV陽(yáng)性率高達(dá)95.0%；E場(chǎng)PRRSV和PRV連續(xù)5年檢測(cè)均為陰性，而PCV2和PPV陽(yáng)性率在10.0%~57.5%之間波動(dòng)。

血清學(xué)監(jiān)測(cè)

對(duì)所有采集的1000份血清樣品進(jìn)行了CSFV、PRRSV、PRV-gB免疫抗體檢測(cè)。結(jié)果（表4）顯示，CSFV、PRRSV、PRV-gB抗體合格率分別為96.9%、99.7%、98.7%，均達(dá)到農(nóng)業(yè)農(nóng)村部要求的70%以上的標(biāo)準(zhǔn)，表明各豬場(chǎng)3種病原的抗體保護(hù)水平良好。

     討論

CSF

近年來(lái)，我國(guó)實(shí)施CSF強(qiáng)制免疫等一系列綜合防控措施，使得該病得到有效控制，CSF凈化工作正逐步推進(jìn)。2011—2018年，王琴等開(kāi)展CSF病原學(xué)監(jiān)測(cè)，發(fā)現(xiàn)健康豬群帶毒率從9.26%下降到0.70%，全國(guó)發(fā)病率和死亡率一直處于下降狀態(tài)，表明我國(guó)CSFV C株疫苗對(duì)我國(guó)現(xiàn)有的流行毒株提供了有效保護(hù)。本次監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)，2015—2019年湖南省5個(gè)種豬場(chǎng)CSF病原學(xué)檢測(cè)均為陰性，且每年免疫抗體水平均在96.0%以上，基本達(dá)到了免疫無(wú)疫狀態(tài)，可適時(shí)開(kāi)展CSFV凈化根除。

PRRS

我國(guó)目前對(duì)PRRS的防控主要采取疫苗免疫。但由于PRRSV變異快，不同地區(qū)流行毒株存在一定差異，防控效果不理想，病毒感染長(zhǎng)期存在。宋玉慧對(duì)2013—2016年河南省規(guī)模豬場(chǎng)采集樣本進(jìn)行病原學(xué)調(diào)查，發(fā)現(xiàn)PRRSV陽(yáng)性率為20.6%；王倩等對(duì)2015—2018年安徽省定點(diǎn)豬場(chǎng)主要疫病病原進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)PRRSV平均陽(yáng)性率為26.9%。本監(jiān)測(cè)從2015年開(kāi)始對(duì)湖南省5個(gè)原種豬場(chǎng)開(kāi)展連續(xù)5年的病原檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)PRRSV與HP-PRRSV陽(yáng)性率分別為2.1%和1.3%，遠(yuǎn)低于前面二者的報(bào)道，表明湖南省種豬場(chǎng)通過(guò)免疫監(jiān)測(cè)等綜合控制措施，使PRRS得到了有效控制。但本監(jiān)測(cè)也發(fā)現(xiàn)，不同年份均有豬場(chǎng)出現(xiàn)PRRS疫情反彈現(xiàn)象，需引起重視。吳佳俊等對(duì)我國(guó)種豬場(chǎng)主要垂直傳播疫病進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)，2015年P(guān)RRS疫情出現(xiàn)了反彈，場(chǎng)陽(yáng)性率與個(gè)體陽(yáng)性率出現(xiàn)了大幅上升。

PR

PR是我國(guó)目前豬群疫病優(yōu)先凈化的病種之一，且已取得了一定的防控成效。本次監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)，湖南省原種豬場(chǎng)中，PRV-gE抗體轉(zhuǎn)陽(yáng)與野毒感染情況仍然存在。林琳等對(duì)福建省不同規(guī)模豬場(chǎng)PRV野毒感染調(diào)查發(fā)現(xiàn)，種豬場(chǎng)PRV-gE個(gè)體陽(yáng)性率為30.2%；占松鶴等對(duì)安徽省規(guī)模化種豬場(chǎng)開(kāi)展PRV血清學(xué)調(diào)查，發(fā)現(xiàn)PRV-gE個(gè)體陽(yáng)性率為18.9%；朱小甫等對(duì)2013—2017年陜西省PRV的分子流行病學(xué)調(diào)查顯示，發(fā)病豬群中PRV野毒感染率達(dá)到了72.3%。本監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)的PRV-gE個(gè)體陽(yáng)性率為9.5%，遠(yuǎn)低于上述報(bào)道，但仍有3個(gè)種豬場(chǎng)反復(fù)出現(xiàn)gE抗體陽(yáng)性，部分場(chǎng)陽(yáng)性率高達(dá)50%以上，因此需要加強(qiáng)生物安全控制，防止野毒感染。

PCVD

PCVD已經(jīng)成為危害我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)的主要疫病之一。其病原PCV2污染面廣、感染率高，引起的危害最大。近年來(lái)，PCV3在我國(guó)豬群中也開(kāi)始出現(xiàn)，因而增加了該類(lèi)疫病的防控難度，已引起了學(xué)者的廣泛關(guān)注。何長(zhǎng)生等對(duì)安徽省部分豬場(chǎng)健康豬群豬圓環(huán)病毒感染情況進(jìn)行調(diào)查發(fā)現(xiàn)，PCV2場(chǎng)陽(yáng)性率與個(gè)體陽(yáng)性率分別為91.7%和67.4%；蔣新華等對(duì)2013—2017年江西省10個(gè)地區(qū)進(jìn)行PCV2檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)個(gè)體陽(yáng)性率為56.4%。本次監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)，湖南省5個(gè)種豬場(chǎng)普遍存在PCV2感染，個(gè)體陽(yáng)性率為22.1%，與其他地區(qū)相比雖然個(gè)體陽(yáng)性率略低，但感染也很普遍，應(yīng)在生產(chǎn)過(guò)程中重視該病防控。

PPI

引起PPI的病原PPV主要感染初產(chǎn)母豬，引起流產(chǎn)、產(chǎn)死胎等繁殖障礙，但母豬本身無(wú)明顯臨診癥狀，容易被忽視。目前國(guó)內(nèi)豬場(chǎng)PPV感染比較嚴(yán)重，污染面廣。孫泉云等對(duì)2015—2017年上海市規(guī)模豬場(chǎng)開(kāi)展PPV病原監(jiān)測(cè)，發(fā)現(xiàn)總陽(yáng)性率為8.7%；吳佳俊等對(duì)我國(guó)種豬場(chǎng)開(kāi)展動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)，PPV場(chǎng)陽(yáng)性率與個(gè)體陽(yáng)性率分別為95.6%和33.6%。本監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)，湖南省種豬場(chǎng)PPV感染普遍，個(gè)體陽(yáng)性率為28.9%，與全國(guó)檢測(cè)數(shù)據(jù)基本持平，但高于上海市規(guī)模豬場(chǎng)數(shù)據(jù)，表明種豬場(chǎng)的PPV感染較嚴(yán)重，需加強(qiáng)控制與凈化。

對(duì)湖南省5個(gè)大型原種豬場(chǎng)連續(xù)5年的監(jiān)測(cè)表明：各種豬場(chǎng)的CSF得到了有效控制，基本達(dá)到了免疫凈化狀態(tài)。而部分原種豬場(chǎng)仍存在不同程度的PRRSV、HP-PRRSV、PRV、PCV2、PPV感染，其中PRRSV、HP-PRRSV、PRV感染反復(fù)出現(xiàn)，PCV2與PPV感染率居高不下，病毒污染面較廣。因此，需通過(guò)免疫、監(jiān)測(cè)、生物安全控制等綜合措施，加強(qiáng)這些疫病的控制與凈化。

　　（責(zé)任編輯：朱迪國(guó)）

轉(zhuǎn)自：中國(guó)動(dòng)物檢疫 ，作者陳峰 等