摘要：為全面掌握山東省小反芻獸疫的病原分布和免疫效果，按照《山東省動物疫病監(jiān)測與流行病學(xué)調(diào)查實施方案》，分別于2018年 和2019年，通過問卷調(diào)查結(jié)合實驗室檢測，在全省開展了小反芻獸疫專項流行病學(xué)調(diào)查。結(jié)果顯示：2018—2019年山東省小反芻獸疫免疫抗體合格率均在80%以上，達(dá)到了國家和省級的要求，抗體水平平穩(wěn)（χ2=0.003，P=0.95632，P>0.05）；病原學(xué)檢測均未發(fā)現(xiàn)陽性樣品。問卷統(tǒng)計結(jié)果顯示：疫病方面，目前養(yǎng)羊場以細(xì)菌性疾病感染為主，沒有發(fā)現(xiàn)小反芻獸疫疫情；飼養(yǎng)場（戶）基本能夠做到調(diào)入羊只的隔離、檢疫，以及養(yǎng)殖場的定期消毒。結(jié)果表明，山東省羊群的小反芻獸疫免疫保護(hù)水平較高，防控措施執(zhí)行較為到位，防控形勢比較理想。今后需持續(xù)開展小反芻獸疫專項流行病學(xué)調(diào)查，從而為今后小反芻獸疫免疫政策的制定和強(qiáng)制免疫退出提供數(shù)據(jù)支撐。
小反芻獸疫（peste des petits ruminants，PPR）是由小反芻獸疫病毒（peste des petits ruminants virus，PPRV）感染小反芻獸引起的一種嚴(yán)重的急性、烈性、接觸性傳染病，以高熱、口炎、胃炎、腹瀉和肺炎等為主要特征。PPR主要通過直接、間接接觸傳染和呼吸道飛沫傳播，潛伏期為4~5d。世界動物衛(wèi)生組織（OIE）將其列為須通報動物疫病，我國將其列為一類動物疫病。山羊感染PPRV后的癥狀較綿羊明顯。本病一般可分為急性型、亞急性型和慢性型3種。其中：慢性型癥狀輕微，主要為體溫升高，類似感冒；亞急性型癥狀為體溫升高到40~41℃，高熱不退，口腔炎癥明顯，有的出現(xiàn)嚴(yán)重腹瀉等；急性型臨床比較少見，發(fā)病迅速，往往發(fā)病后2d內(nèi)死亡。 2007年P(guān)PR由境外首次傳入我國西藏阿里地區(qū)，隨后疫情迅速得到控制。2013 年底，PPR再次傳入我國，并波及多個?。▍^(qū)、市）。為有效控制和根除PPR疫情，山東省根據(jù)《全國小反芻獸疫消滅計劃（2016—2020年）》及《山東省小反芻獸疫消滅計劃（2016—2020年）實施方案》的具體要求，對全省（青島市除外）羊只采取全覆蓋強(qiáng)制免疫政策。為準(zhǔn)確掌握2018—2019年山東省境內(nèi)的PPR免疫效果以及病原感染情況，分別于2018年11月和2019年11月，在全省開展了PPR專項流行病學(xué)調(diào)查，以期為山東省的PPR防控提供適用、科學(xué)、有效的防控措施。
材料與方法
免疫合格樣品是指經(jīng)PPR阻斷ELISA檢測為抗體合格的血清樣品，反之為免疫不合格樣品；免疫合格群體是指免疫樣品合格率≥70%的群體，反之為不合格群體；病原學(xué)陽性樣品是指經(jīng)PPR熒光RT-PCR檢測為陽性的樣品，反之為病原學(xué)陰性樣品。 研究群。全省所有羊存欄量≥50只的規(guī)模飼養(yǎng)場以及有羊散養(yǎng)戶的自然村，其中1個規(guī)模飼養(yǎng)場或1個自然村內(nèi)所有散養(yǎng)戶存欄羊作為1個群體。 抽樣單元。群體層選擇每個規(guī)模場和有羊散養(yǎng)戶的自然村，群體內(nèi)選擇所有免疫PPR疫苗的羊。 根據(jù)全省養(yǎng)殖情況，采用兩階段抽樣方法。 第1階段，先計算全省專項流行病學(xué)調(diào)查所需的總抽樣場數(shù)，用估計流行率方法，按 95%的置信水平、90%的預(yù)期免疫合格率（根據(jù)往年的測量結(jié)果確定預(yù)期免疫合格率）、5%的可接受誤差、無窮大場群，利用公式（1）計算出的抽樣場群數(shù)為139個，根據(jù)各市規(guī)?；蝻曫B(yǎng)場和自然村的群體實際情況，按照比例分配到各地市。
其中p為預(yù)期合格率，z為置信水平，e為可接受誤差。
第2階段，計算所需的抽樣羊只數(shù)量。仍采用估計流行率方法，按 95%的置信水平、90%的預(yù)期免疫合格率（根據(jù)以往的測量結(jié)果確定預(yù)期免疫合格率）、10%的可接受誤差、群體數(shù)量無窮大，計算得出場群內(nèi)需抽取不少于35只羊的全血。場內(nèi)隨機(jī)選羊，按系統(tǒng)隨機(jī)方法抽樣，如全群數(shù)量小于35只，則全部采樣。 根據(jù)全省規(guī)模場和自然村的養(yǎng)殖情況，采用兩階段抽樣方法。 第1階段，計算全省所需的總抽樣場數(shù)，采用證明無疫的方法，按照估計場點(diǎn)流行率1%，置信水平95%，依據(jù)公式（2）計算出調(diào)查的場點(diǎn)數(shù)不少于299個，根據(jù)各地市規(guī)?；蝻曫B(yǎng)場和自然村的群體實際情況，按比例分配。
其中n為抽樣個數(shù)，CL為置信水平，D為群內(nèi)個體數(shù)與預(yù)定流行率的乘積，即群中的陽性動物數(shù)，N為群內(nèi)個體數(shù)，Se為檢測方法的敏感性。
第2階段，計算所需的抽樣羊只數(shù)量。仍用證明無疫的方法，按95%的置信水平、3%的預(yù)期流行率、群體數(shù)量無窮大計算，則場群內(nèi)需抽取不少于99只羊的鼻拭子。場內(nèi)隨機(jī)選羊，按系統(tǒng)隨機(jī)方法抽樣，如全群數(shù)量小于99只，則全部采集。 采用現(xiàn)場詢問、查閱檔案記錄、填寫調(diào)查表和采樣檢測等方式，主要調(diào)查養(yǎng)殖場（戶）的基本信息、養(yǎng)殖情況、防疫措施、無害化處理和PPR發(fā)病情況等。 采集樣品按照NY/T 541—2016標(biāo)準(zhǔn)中的相關(guān)要求，妥善保存和運(yùn)輸。PPRV抗體檢測，采用ELISA方法；病原學(xué)檢測，采用熒光RT-PCR方法。
結(jié)果與分析
2018年共采樣檢測畜場1481個，包括規(guī)模羊場763個、散養(yǎng)戶716個、市場2個，共采集免疫血清樣品30688份、病原學(xué)樣品8703份；2019年共采樣監(jiān)測畜場2284個，包括規(guī)模羊場1380個、散養(yǎng)戶904個、市場59個，共采集血清樣品31769份、病原學(xué)樣品13867份。2018—2019年各地市采樣檢測場群數(shù)量見表1。
問卷統(tǒng)計結(jié)果顯示：疫病方面，養(yǎng)羊場以細(xì)菌性疾病為主，沒有發(fā)現(xiàn)PPR疫情；調(diào)運(yùn)檢疫方面，飼養(yǎng)場（戶）對外調(diào)羊只基本能做到隔離觀察，確保健康后合群飼養(yǎng)，隔離期一般為3~5d；衛(wèi)生方面，飼養(yǎng)場（戶）基本能做到定期消毒，規(guī)模場措施更為得當(dāng)，一般能做到每日消毒，散養(yǎng)戶消毒時間間隔稍長。
抗體檢測。2018年共檢測羊免疫血清樣品30688份，抗體合格28826份，平均抗體合格率為93.09%；2019年共檢測羊免疫血清樣品31769份，抗體合格29666份，平均抗體合格率為92.90%（表2）。整體來看，山東省PPR免疫效果較好，各市免疫抗體合格率基本都在90%以上，遠(yuǎn)超過了國家和省級的最低要求，可以確保免疫動物處于有效保護(hù)狀態(tài)。2018年與2019年免疫抗體合格率卡方檢驗顯示無顯著差異（χ2=0.003，P=0.956 32，P>0.05），表明全省PPR免疫措施得當(dāng)，抗體水平平穩(wěn)。但個別地市PPR抗體水平有待提高，比如濟(jì)寧市2018和2019年的樣品合格率僅為83.15%和79.19%，需要進(jìn)一步加強(qiáng)免疫。 病原學(xué)檢測。2018—2019年所有病原學(xué)樣品檢測全部為陰性。
討論
本次調(diào)查發(fā)現(xiàn)，大多數(shù)養(yǎng)殖場（戶）比較重視PPR防控，對PPR免疫持樂觀態(tài)度，從流行病學(xué)調(diào)查的總體情況看，全省PPR免疫狀況良好，未檢出病原，也未發(fā)現(xiàn)臨床病例，說明全省PPR防控形勢較好，疫情發(fā)生風(fēng)險較低。但本次調(diào)查中的場內(nèi)抽樣采用證明無疫方式計算樣本量，設(shè)定的預(yù)期流行率為3%，相對較高，導(dǎo)致樣本量稍低，即使未檢測到病原學(xué)陽性，也無法確定全省不存在病原感染。
雖然山東省的PPR防控形勢較好，但隨著活羊及其產(chǎn)品的全國流通，PPR的傳入風(fēng)險依然存在，因此PPR防控工作不可松懈，需要增強(qiáng)防控意識，尤其是散養(yǎng)戶，要嚴(yán)防從疫區(qū)引入羊只，從外地引入的羊只要嚴(yán)格隔離、檢疫。今后還需持續(xù)開展PPR專項流行病學(xué)調(diào)查，以便為PPR免疫政策的制定和將來PPR強(qiáng)制免疫退出提供更加有力的數(shù)據(jù)支撐。
結(jié)論
調(diào)查認(rèn)為，山東省PPR強(qiáng)制免疫效果較好，免疫抗體水平遠(yuǎn)超過國家和省級的最低要求，養(yǎng)殖場（戶）防控意識較強(qiáng)，防控形勢比較理想，PPR發(fā)生風(fēng)險較低。但仍需繼續(xù)加強(qiáng)免疫和調(diào)入羊群的隔離檢疫，持續(xù)開展流行病學(xué)調(diào)查，從而為全省盡快消滅PPR奠定基礎(chǔ)。
（責(zé)任編輯：朱迪國）
轉(zhuǎn)自：中國動物檢疫 ，作者陳峰 等
